• Suivi en spectroscopie et imagerie RMN de souris KO-PLP : application pour l’évaluation thérapeutique de substances neuroréparatrices dans les dysmyélinisations héréditaires (PMD, SPG2)

Dr Jean-Pierre Renou et M. Pierre Larvaron – INRA – St Genès Champanelle – Subvention : 45 000 €

Les leucodystrophies représentent un groupe hétérogène d’affections génétiques caractérisées par une atteinte préférentielle de la substance blanche du système nerveux et de son principal constituant, la myéline. Parmi les troubles constitutionnels de la myéline, les formes les mieux identifiées sont celles liées à des mutations du gène des protéolipoprotéines (PLP). Elles peuvent être responsables, chez l’homme comme chez les nombreux mutants animaux, d’affections de sévérité très variable : les formes les plus sévères sont liées à une absence (ou paucité) de myéline (maladie de Pelizaeus-Merzbacher, souris jimpy, rat md) et les formes les plus modérées à un trouble fonctionnel de l’interaction myéline-axone (paraplégie spastique liée à l’X, souris par inactivation de PLP). Dans ces affections, le challenge thérapeutique doit être non seulement la réparation de la myéline mais surtout la lutte contre la dégénérescence axonale (neuroprotection ou neuroréparation). Afin de pouvoir tester le plus grand nombre possible de substances, avec des applications rapides chez l’homme, il est nécessaire d’avoir un suivi non invasif, qualitatif et quantitatif, de l’état des fibres myélinisées du système nerveux central (SNC) chez des petits animaux, en particulier la souris. Dans ce but, nous avons mis au point des protocoles d’analyse par Résonance Magnétique Nucléaire (RMN) de cerveau et de moelle épinière de souris. Son utilisation, dès le cinquième jour de vie postnatale, nous a permis un suivi au cours du développement. L’Imagerie de RMN (IRM) permet de visualiser les changements des interactions de l’eau avec les macromolécules de la substance blanche. La Spectroscopie de RMN (SRM) nous permet de suivre in vivo, dans différentes régions du cerveau de souris, des métabolites permettant d’apprécier la dégénérescence axonale (N-acetylaspartate (NAA)), la présence de myéline (Choline), le pool Glutamate-Glutamine.

Dans ce projet, nous nous proposons d’appliquer les méthodes RMN développées au suivi de souris transgéniques dysmyélinisées. Nous avons fait le choix des souris avec inactivation du gène PLP (KO PLP) qui, outre l’avantage d’une survie et reproduction normales, sont un modèle parfait de dégénérescence axonale progressive par trouble de l’interaction myéline-axone. Les données RMN seront confrontées aux données cliniques, électrophysiologiques et anatomopathologiques. Dans une seconde approche, en collaboration avec la société NEURONAX, l’effet thérapeutique de molécules ayant des propriétés neuroprotectrices et/ou neuroréparatrices, in vitro et in vivo, sera testé sur ce modèle par injection intrathécale.